09244_基因工程(实践)_教材书籍

前辅文

第一篇 常用分子生物学实验技术及原理

第一章 载体和宿主细胞

第二章 工具酶

第三章 电泳

第四章 PCR基因扩增

第五章 基因组文库和cDNA文库的构建

第六章 克隆化DNA的定点突变

第七章 DNA序列测定

第八章 基因表达

第九章 印迹法及分子检测

第十章 实时荧光定量PCR技术

第十一章 RNA干扰

第十二章 基因编辑

第二篇 学生实验

实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA的转化

实验二 质粒DNA的提取及其定性定量分析

实验三 琼脂糖凝胶电泳检测DNA

实验四 PCR基因扩增及产物的回收

附 扩增片段的全序列

实验五 DNA重组

实验六 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达及检测

Ⅰ 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达

Ⅱ 活性分析检测表达蛋白

Ⅲ SDS-PAGE检测表达蛋白

实验七 蛋白质印迹

ⅠSDS-PAGE

Ⅱ电转移

Ⅲ特异性谱带的检出

附 小鼠腹水多克隆抗体制备

实验八 哺乳动物基因组DNA的分离及分析

实验九 植物基因组DNA的提取

实验十 大肠杆菌基因组DNA的提取

实验十一 植物总RNA的提取

实验十二 RT-PCR(反转录-聚合酶链反应)

附 β-微管蛋白编码序列

实验十三 实时荧光定量PCR对小鼠脾细胞特定基因表达的分析

实验十四 利用聚合酶链反应(PCR)定点突变

实验十五 寡核苷酸介导的定点突变

实验十六 Southern杂交

Ⅰ 大肠杆菌基因组DNA Southern杂交

Ⅱ 小鼠肝基因组DNA Southern杂交

实验十七 双脱氧链终止法测定DNA序列

实验十八 DNA核苷酸序列分析——银染色法

实验室仪器操作技术

实验设计选录

分子克隆策略

分子克隆经验

附录

一、常用核酸、蛋白质换算数据

二、 氨基酸符号及相应密码子

三、常见市售酸碱的浓度

四、离心机转速与相对离心力的换算

五、常用电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液

六、常用限制酶酶切位点及缓冲液

七、分子生物学常用试剂和缓冲液的配制

八、常用细菌培养基和抗生素溶液

九、X射线底片的冲洗方法

十、溴化乙锭溶液的净化处理

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